倉(cāng)鼠組織elisa試劑盒的處理及保存方法

　　倉(cāng)鼠組織elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，往預(yù)先包被倉(cāng)鼠組織蛋白酶捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的倉(cāng)鼠組織蛋白酶呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。

　　一、處理及保存方法

　　1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

　　2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

　　3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

　　5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

　　二、操作注意事項(xiàng)

　　1.倉(cāng)鼠組織elisa試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

　　2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　3. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

　　4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

　　三、洗板方法

　　1、手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

　　2、自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。