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甜菜堿含量測試盒微量法

簡要描述:甜菜堿含量測試盒微量法公司正在出售的產品:精致蛋白胨進口、國產Peptone(From porcine meat)500克BR肉蛋白胨進口、國產Beef Peptone250克BR蠶蛹蛋白胨進口、國產蠶蛹蛋白胨250克BR血粉蛋白胨進口、國產血粉蛋白胨250克BR

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-24
  • 訪  問  量:925

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內的季銨型水溶性生物堿,是生物體內的氧化產物,可以增強免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤,并可作為甲基供體,參與促進動物蛋白質和脂肪代謝、增進食欲、緩和應激、調節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用,在化工、醫(yī)藥、食品添加劑等領域有較廣泛的應用。

測定原理

甜菜堿在強酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應產生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液,在525nm處有特征吸收峰,測定525nm處的吸光值,可得樣品的甜菜堿含量。

自備實驗用品及儀器

天平、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、甲醇、、鹽酸和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

甜菜堿含量測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6933

11.png

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

10mL 電泳級橙黃G溶液 Orange G Solution,EG 常溫,避光干燥保存

2 ug pG-Tf2 pG-Tf2 低溫運輸,-20℃保存

臨床檢驗系列  

1瓶 HT1080細胞株 HT1080 低溫運輸和保存

沙氏葡萄糖瓊脂顆粒(2015藥典)  250g

5mg 硫氧還蛋白 Thioredoxin -20℃保存

100mL Sodium Cacodylate Buffer(二甲胂酸鈉緩沖液),0.1M,pH6.5   Sodium Cacodylate Buffer,0.1M,pH6.5   常溫保存

1 管 Stbl4大腸桿菌 Stbl4 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pSE934 pSE934 低溫運輸,-20℃保存

5次 大提柱式植物RNAout Maxi Column Plant RNAOUT 4℃保存

2 ug pCFS119 pCFS119 低溫運輸,-20℃保存

甜菜堿含量測試盒微量法ATG16A/ATG16L1  自噬相關蛋白16A抗體 規(guī)格: 0.2ml

TP53I8/EI24  瘤蛋白p53誘導蛋白8 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/APC  APC標記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716)  磷酸化小板源性生因子受體B抗體 規(guī)格: 0.1ml

FbxO6  F-box蛋白相關蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml

FoxP3  叉蛋白P3抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD80/B7-1  刺激分子B7-1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

C17orf74  17號染色體開放閱讀框74抗體 規(guī)格: 0.2ml

AKT/PKB  蛋白激B 規(guī)格: 0.1ml

FMDV Polyprotein (3D polymerase)  口蹄疫毒 0.2ml

Cyclin D3  周期素D3抗體 規(guī)格: 0.1ml

UGT1A9  尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移1A9 規(guī)格: 0.2ml



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