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二氫黃酮醇還原酶(DFR)測試盒微量法

簡要描述:二氫黃酮醇還原酶(DFR)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:改良MSRV培養(yǎng)基 英文名稱:MSRV Medium,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g BPL瓊脂 英文名稱:BPL Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g BPLS瓊脂 英文名稱:BPLS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g MIO培養(yǎng)基 英文名稱:MIO Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:697

詳細介紹

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:二氫黃酮醇還原酶(DFR)測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6464

產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:

測定意義:

二氫黃酮醇還原酶是類黃酮合成途徑中的一個關鍵酶,在決定植物的花色、葉色、果色和其他經(jīng)濟器官的色澤及其營養(yǎng)品質(zhì)方面起著重要作用。

測定原理:

二氫黃酮醇還原酶作用于二氫槲皮素產(chǎn)生兒茶素,可與縮合形成紅色化合物,在500nm處有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品:

研缽、低溫離心機、震蕩儀、氮吹儀、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、水浴鍋、無水乙醇、乙酸乙酯。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

1瓶 HT-29(RFP)細胞株 HT-29(RFP) 低溫運輸和保存

2 ug pYCPlac22-EGFP pYCPlac22-EGFP 低溫運輸,-20℃保存

10次 百萬堿基級細菌(G-)DNAout  

2 ug pAAV-LacZ pAAV-LacZ 低溫運輸,-20℃保存

0.6%酵母膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 250g

1瓶 293ET細胞株 293ET 低溫運輸和保存

96支 200μLRNase-free黃吸頭(盒裝已滅菌帶芯)  常溫

24 T 醛縮測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

250mL MES Buffer,0.2M,pH6.5   MES Buffer,0.2M,pH6.5   常溫保存

100mg P- 苯基 p-Nitrophenylphosphorylcholine(NPCC) -20℃保存

2 ug pLVX-Tet-3G pLVX-Tet-3G 低溫運輸,-20℃保存

二氫黃酮醇還原酶(DFR)測試盒微量法DAL1/EPB41L3  細胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-p57 Kip2 (Thr310)  磷酸化周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體 規(guī)格: 0.1ml

OLFM4  凋亡蛋白OLFM44抗體 規(guī)格: 0.2ml

SMC4  染色體結構維持蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCL25/TECK  胸表達趨化因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

C1GALT1  N-乙酰半糖胺糖蛋白3、β-半糖轉移1抗體 規(guī)格: 0.2ml

RAMP1  受體活性修飾蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CKLFH6/CMTM6  趨化素樣因子超家族成員6抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLHL3  Kelch樣蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-GNA12(Ser68)  磷酸化鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格: 0.1mlTOP2 alpha  DNA拓普西異構ⅡA抗體 規(guī)格: 0.1ml

TRIM17/RNF16  環(huán)指蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Chicken IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

Contactin 3  腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml 

 


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