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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  基因檢測PCR試劑盒  >  熒光定量PCR  >  50次大腸桿菌通用PCR試劑盒

大腸桿菌通用PCR試劑盒

簡要描述:大腸桿菌通用PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品豬小腸上皮細(xì)胞;ZYM-DIEC02正辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Octanoic acid質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十八烷(Standard for G

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-01-02
  • 訪  問  量:818

詳細(xì)介紹

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0E1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR
反應(yīng)的特異性決定因素為:
引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
堿基配對原則;
Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:大腸桿菌通用PCR試劑盒 
產(chǎn)品規(guī)格: 50
產(chǎn)品貨號:BK-P97041
儲存條件:-20避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

產(chǎn)品特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1.
使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2.
反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3.
抗干擾能力強,反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。

特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan

TaqMan
探針的特性:
15′端標(biāo)記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC
23′端標(biāo)記有熒光淬滅基團 Quencher, Q
3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, RQ分開,發(fā)熒光
4Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actinGAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
胰島素();重組人胰島素  Human recombinant Insulin  分子式:C257H383N65O77S6      分子量:5807.58

粘蛋白  Mucin from bovine submaxillary glands  物理性狀及指標(biāo):  外觀:……………………凍干粉

重組蛋白G瓊脂糖凝膠FF  rProtein G Sepharose  技術(shù)指標(biāo):  基質(zhì):……………………6%高度偶聯(lián)的瓊脂糖凝膠

DiI標(biāo)記氧化型低密度脂蛋白()  Human DiI-Ox-LDL  技術(shù)
麗春紅S  Ponceau S  分子式:C22H12N4Na4O13S4            分子量:760.57

亮綠SF(淡黃)  Light Green SF Yellowish  分子式:C37H34N2O9S3.2Na          分子量:792.85

硫堇(>90%,BS)  Thionin  分子式:C12H10N3S.C2H3O2      分子量:287.34

羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G  Rhodamine 6G  分子式:C28H31N2O3.Cl         分子量:479.02

玫紅酸(AR)  Rosolic acid  分子式:C19H14O3  分子量:290.31
重酸鉀shēng huà shì jì容量:5  Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

酵母氮基礎(chǔ)-無基酸無銨NA  HumanAquaporin1,AQP-1ELISAKit人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

二乙酸鋁,英文名或英文縮寫:Aluminum acetate basic,級別:AR,規(guī)格:100毫升  人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

玫紅酸 p-Rosolic acid,85% 603-45-2 25G 通用試劑  兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒 Rabbit Bone morphogenetic protein 2,BMP2 ELISA kit

DL-柏安醋 DL-2-cmino-4-mqthylpqntcnoic ccid 38-39-  沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 ,英文名: CPAF ELISA Kit
大腸桿菌通用PCR試劑盒移液器P20100毫克保存:-20  HumanActivinA,ACV-AELISAKit人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Casaminoacids,Vitaminassay 100g原裝 BD 228820  人促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

乙二安四乙酸二鈉鋅鹽shēng huà shì jì容量:28100  小鼠17-酮類固醇(17-KS)免疫試劑盒 Mouse 17-ketosteroids,17-KS ELISA


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